賽默飛Thermo LightCycler® 480 II 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀介紹

賽默飛（Thermo Fisher Scientific）的LightCycler® 480 II實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀是一款高性能、多功能的PCR檢測儀器，專(zhuān)為基因表達研究、基因分型、拷貝數變異分析、突變檢測等實(shí)驗需求而設計。作為分子生物學(xué)研究中廣泛應用的儀器之一，LightCycler® 480 II以其高通量、高靈敏度、強大的多重檢測能力以及快速熱循環(huán)技術(shù)，在科研、臨床和工業(yè)檢測領(lǐng)域表現出色。

一、儀器概述

LightCycler® 480 II實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀結合了先進(jìn)的光學(xué)檢測系統與快速溫控技術(shù)，是一款為高精確度核酸定量分析而設計的設備。該儀器支持96孔和384孔反應板，能夠適應不同規模的實(shí)驗需求，同時(shí)以其出色的熒光檢測能力和數據分析功能，為分子生物學(xué)研究提供了可靠的技術(shù)平臺。

這款設備可以實(shí)時(shí)監測PCR擴增過(guò)程中熒光信號的變化，幫助研究人員動(dòng)態(tài)、定量分析目標基因的表達或突變狀態(tài)。無(wú)論是基礎研究還是臨床診斷，LightCycler® 480 II都能夠為科學(xué)家提供高效、穩定和可靠的數據支持。

二、技術(shù)特點(diǎn)

1. 高性能光學(xué)檢測系統

LightCycler® 480 II配備高靈敏度光學(xué)模塊，支持多通道熒光檢測，可對多個(gè)目標基因進(jìn)行同時(shí)監測。

• 高靈敏度檢測：適合低豐度基因的分析，可靈敏檢測低拷貝數樣本。

• 多通道支持：支持多達5種熒光染料的同時(shí)檢測，適合多重PCR實(shí)驗。

• 熒光染料兼容性：支持SYBR Green、TaqMan探針、EvaGreen以及其他常見(jiàn)熒光標記物。

2. 快速熱循環(huán)技術(shù)

LightCycler® 480 II采用高效熱循環(huán)模塊，能夠快速升溫和降溫，大幅度縮短PCR實(shí)驗時(shí)間，提高檢測效率。

• 快速反應速度：每次實(shí)驗的反應時(shí)間顯著(zhù)縮短，同時(shí)保持較高的擴增效率。

• 精確溫控系統：溫控精度達到±0.1°C，確保PCR擴增的高穩定性和重復性。

3. 多通量配置

該儀器支持兩種孔板配置，滿(mǎn)足不同實(shí)驗室規模需求：

• 96孔板：適合中等規模實(shí)驗和科研使用。

• 384孔板：為高通量實(shí)驗設計，支持大規模篩查和復雜檢測。

4. 智能數據分析

LightCycler® 480 II配備功能全面的數據分析軟件，能夠滿(mǎn)足用戶(hù)的多樣化數據處理需求。

• Ct值分析：快速、準確地識別循環(huán)閾值（Ct值），提供可靠的擴增曲線(xiàn)。

• 熔解曲線(xiàn)分析：用于擴增反應的特異性驗證，幫助識別非特異性產(chǎn)物或污染。

• 絕對與相對定量：支持基于標準曲線(xiàn)的絕對定量以及2^-ΔΔCt法的相對定量分析。

• 突變檢測和基因分型：支持高分辨率熔解曲線(xiàn)（HRM）分析，用于基因突變檢測和基因分型研究。

5. 靈活性與兼容性

LightCycler® 480 II儀器設計靈活，適應多種實(shí)驗類(lèi)型和需求：

• 多種反應模式：支持標準PCR、實(shí)時(shí)定量PCR、多重PCR、熔解曲線(xiàn)分析等。

• 兼容不同實(shí)驗條件：支持多種熒光標記體系和反應方案。

• 自動(dòng)化擴展：可與實(shí)驗室自動(dòng)化設備集成，進(jìn)一步提高實(shí)驗效率。

三、核心功能

1. 基因表達分析

LightCycler® 480 II能夠實(shí)時(shí)監控基因表達水平的變化，適用于各種基因表達研究場(chǎng)景。

• 相對定量：對樣本間基因表達水平差異進(jìn)行分析。

• 絕對定量：通過(guò)標準曲線(xiàn)直接計算基因拷貝數。

2. 突變檢測

該儀器可以靈敏檢測低頻率突變，適用于點(diǎn)突變、插入/缺失突變等多種基因突變類(lèi)型的研究。

• HRM分析：高分辨率熔解曲線(xiàn)技術(shù)能夠高效區分樣本中的突變和野生型序列。

• 單核苷酸多態(tài)性（SNP）檢測：快速準確識別樣本中的特定基因變異。

3. 基因分型

LightCycler® 480 II支持基因分型實(shí)驗，通過(guò)分析熒光信號，對樣本進(jìn)行遺傳多態(tài)性分型。

4. 拷貝數變異（CNV）分析

通過(guò)定量PCR實(shí)驗，該儀器能夠檢測基因組中目標基因的拷貝數變化，幫助研究拷貝數擴增或缺失的基因。

5. 病毒載量檢測

LightCycler® 480 II被廣泛應用于病毒載量分析，通過(guò)定量檢測病毒核酸，監測感染狀況和治療效果。

四、技術(shù)參數

以下為L(cháng)ightCycler® 480 II的主要技術(shù)參數：

五、儀器優(yōu)勢

1. 高靈敏度與高通量

LightCycler® 480 II具檢測靈敏度和高通量能力，可同時(shí)處理大批量樣本，顯著(zhù)提高實(shí)驗效率。

2. 多功能性

該儀器支持多種實(shí)驗類(lèi)型，包括基因表達分析、基因分型、突變檢測和拷貝數分析等，覆蓋了絕大多數PCR應用場(chǎng)景。

3. 操作簡(jiǎn)便

儀器的設計注重用戶(hù)體驗，配套軟件界面直觀(guān)，實(shí)驗設置和數據分析簡(jiǎn)便易用。

4. 實(shí)驗結果可靠

高精度的溫控系統和靈敏的光學(xué)模塊確保了實(shí)驗結果的準確性和可重復性。

5. 靈活的擴展能力

兼容多種耗材和反應方案，支持與自動(dòng)化工作站集成，適應不同實(shí)驗室的需求。

六、應用領(lǐng)域

LightCycler® 480 II在多個(gè)領(lǐng)域得到了廣泛應用：

1. 基礎研究

• 基因表達調控研究

• 基因功能研究

• 遺傳多樣性分析

2. 醫學(xué)研究

• 腫瘤標志物檢測

• 遺傳疾病相關(guān)基因分析

• 病毒載量檢測和病原體定量

3. 藥物開(kāi)發(fā)

• 藥物基因組學(xué)研究

• 個(gè)體化醫療相關(guān)基因研究

• 藥物代謝相關(guān)基因分型

4. 工業(yè)檢測

• 食品安全檢測中的病原體分析

• 環(huán)境樣本中的微生物檢測

七、總結

賽默飛LightCycler® 480 II實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀憑借其高靈敏度、多通道檢測、快速熱循環(huán)技術(shù)和強大的數據分析能力，成為分子生物學(xué)和基因組學(xué)研究中的重要工具。它不僅能夠滿(mǎn)足基礎科研需求，還在臨床和工業(yè)檢測領(lǐng)域發(fā)揮了重要作用。

無(wú)論是小規模實(shí)驗還是大規模高通量篩查，LightCycler® 480 II都能夠為用戶(hù)提供可靠的結果和高效的實(shí)驗體驗，為基因研究和診斷提供全面的技術(shù)支持。